中國農業大學的陳老師於(yú)五月在我公司代測(cè)豬瘟抗體、狂犬病病毒、藍耳病、白介素、幹擾素等相關系列17個指标的ELISA實驗:現需發表文獻特我公司關於(yú)豬瘟抗體等實驗的詳細操作流程以及結果判定方法。我司技術做出如下詳細解答:
實驗操作方法:
1.用包被液将豬瘟弱毒單抗純化酶聯抗原、豬瘟強毒單抗純化酶聯抗原各做100倍稀釋,每孔包被100µl,4℃放置一晚上。
2.次日取出,甩去孔内液體,3×3′沖洗。
3.将待檢血清以PBS液做400倍稀釋,每孔加100µl同時将豬瘟陽性血清、豬瘟陰性血清各做100倍稀釋,於對照孔中加100μl。37℃溫育1.5h~2h。
4.重複第二步,取出,甩去孔内液體,3×3′洗滌。
5.将兔抗豬IgG酶标抗體以PBS液做100倍稀釋,每孔加100μl,37℃溫育1.5h~2h。
6.重複第4步。
7.每孔加底物溶液100µl,室溫下觀察顯色反應。當陰性對照孔稍顯色時,立即終止反應,並以陰性孔做空白對照。
8.每孔加終止液50µl立即於酶聯免疫吸附檢測儀測定490nm波長的光密度。
結果判定
1.在豬瘟弱毒酶聯闆上,OD≥0.2,爲豬瘟弱毒抗體陽性;OD<0.2,爲豬瘟弱毒抗體陰性。
2.在豬瘟強毒酶聯闆上,OD≥0.5,爲豬瘟強毒抗體陽性;OD<0.2,爲豬瘟強毒抗體陰性