赭曲黴素（Ochratoxin）試劑盒使用說明書

　　　　　　赭曲黴素（Ochratoxin）試劑盒使用說明書

使用目的：
本試劑盒用於飼料、魚、蝦和肉類組織（如雞、牛肉和豬肉），雞蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿樣中赭曲黴素（Ochratoxin）殘留的定量檢測。
實驗原理
本試劑盒採用直接競争ELISA方法，在微孔闆包被有赭曲黴素（Ochratoxin）偶聯抗原，加入赭曲黴素（Ochratoxin）标準品或樣品，遊離赭曲黴素（Ochratoxin）與微孔條上預包被的赭曲黴素（Ochratoxin）偶聯抗原互相競争抗赭曲黴素（Ochratoxin）抗體酶标記物，用TMB底物顯色，加入終止液後顔色由藍色變爲黃色，用酶标儀在450nm波長下進行檢測，吸光值與樣品中赭曲黴素（Ochratoxin）含量成反比，通過标準曲線計算樣品中赭曲黴素（Ochratoxin）的含量。
試劑盒組成
1 預包被的赭曲黴素（Ochratoxin）偶聯抗原的可拆酶标闆：1塊（12孔×8條）。
2 赭曲黴素（Ochratoxin）标準品：6瓶（1ml/瓶），含量分别是：0μg/ml，0.01μg/ml,0.02μg/ml,0.04μg/ml,0.08μg/ml,0.16μg/ml
3抗赭曲黴素（Ochratoxin）抗體酶結合物：1瓶（6ml）。
4顯色液A：1瓶（6ml）。
5顯色液B：1瓶（6ml）。
6終止液：1瓶（6ml），2M硫酸
。
7樣本稀釋液：1瓶（10×,  6ml），用於樣品稀釋用。
8濃縮洗滌液：1瓶（20×，20ml），用於洗闆。
貯存
1 試劑盒貯存於2~8℃，切勿冷凍
2 未用完的微孔闆應該密封幹燥保存
注意事項
1 使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。
2 不要使用過期試劑盒。
3 試劑盒使用前，将試劑恢複至室溫（25±2℃），建議至少回溫2小時。
4 标準品中含有黃曲黴素，使用時應特别注意，操作時應帶手套。
5 終止液中含有硫酸
，使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
6 不同标準品、樣品所用吸頭不能混用，否則會影響試驗結果。
7 不同批号試劑盒中的試劑不得混用；不同标準品、樣品所用吸頭不得混用，否則會影響實驗結果。
8 稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液，否則會影響實驗結果
9 混合試劑時應避免起泡。
樣品處理程序（樣品在提取過程中，要嚴格按說明書操作，提取過程中應準確稀釋，否則會出現結果不準確，樣品應當保存在陰涼避光之處及冷藏保存）
1取10g粉碎的樣品，加 20ml 70%甲醇溶液
2強力振蕩3分鍾
3用Whatman 濾紙過濾
4取25µl處理後的樣品，加入25µl樣本稀釋液於反應孔中（樣本稀釋倍數爲2）
酶免分析步驟
1 實驗須知
2實驗開始前請将所有試劑於盒外充分恢複至室溫（25±2℃），時間約2小時。回溫至室溫（25±2℃）後再取出微孔條，多餘的微孔條重新密封立即於2~8℃幹燥保存
注：一定保證回溫充分，否則影響檢測的度和準確度。
3使用後請立即将試劑放回2~8℃保存
4請不要改變分析程序
5請使用的微量移液器
6操作一旦開始，請不要中斷任何程序
7ELISA結果的可重複性極大程度的取決於操作程序，請嚴格按照要求操作
8爲避免交叉污染，每個标準品和樣品均應使用不同的吸頭加樣
9 加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或内表面
10分析步驟
11預先進行編号，标記B0、标準品和樣品的位置，推薦進行雙孔檢測
12取所需數量的微孔（微孔條可拆），将多餘闆條重新密封並立即放回2~8℃保存
13樣品稀釋液（10×）、濃縮洗滌液（10×）稀釋成工作液（蒸餾水或去離子水稀釋）
14在B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml标準品溶液
15在各标準孔中加入50μl的标準品溶液
16在各樣品孔中加入50µl樣品溶液
17在所有孔中加入50µl的抗黃曲黴素B1抗體酶結合物
18輕輕晃動反應闆幾秒鍾。
1937℃溫浴30min （溫浴過程中不時輕拍反應闆，可以減少雙孔誤差）
20甩掉孔中液體，用洗液洗滌微孔闆5次
，zui後一次應在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。
21反應
22洗滌程序完成後，立即用微量移液器在每個微孔中先加入50µl顯色液A，再加 50µl顯色液B；輕微晃動反應闆使之*混勻
23 37℃溫浴10min
24 每孔中加入50µl終止液，混勻
25 在450nm下檢測吸光度，結果在5min内讀取。

上海恒遠生物科技有限公司是一家生物技術企業，主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑的研發、銷售。主要銷售ELISA試劑盒，标準品對照品，血清，抗體，生物試劑、培養基等科研試劑，保證質量，價格合理，歡迎您（  ）。

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