人熱休克因子1試劑盒

産品名稱：人熱休克因子1試劑盒
英文名稱：Human Heat Shock Factor 1,HSF1 ELISA KIT
種屬：人
使用範圍：科研
産品規格：96人份/48人份
各種種屬：人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬
、犬、牛、羊…
标本齊全：血清、血漿、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液、關節液、胸腔溢液等…
經營品牌:美國ＲＤ　ＲＢ　ＩＢＬ
保存條件：2-8℃
有效期：６個月
運輸條件：低溫運輸，用幹冰或者冰袋低溫運輸。
人熱休克因子1試劑盒保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加标本和加酶結合物後。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間
，這一保溫過程稱爲溫育（incubation），有人稱之爲孵育，在ELISA中似不恰當。ELISA屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合隻在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法爲例，加入闆孔中的标本，其中的抗原並不是都有均等的和固相抗結合的機會，隻有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經擴散才能達到反應的終點
。在其後加入的酶标記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是爲什麽ELISA反應總是需要一定時間的溫育。溫育常採用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的合适溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反應一般在37℃經1-2小時，産物的生成可達。爲加速反應，可提高反應的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜採用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更爲*，在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜
，以形成zui多的沉澱。但因所需時間太長，在ELISA中一般不予採用。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均採用水浴，可将ELISA闆置於水浴箱中，ELISA闆底應貼著水面，使溫度迅速平衡。爲避免蒸發，闆上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋闆孔，此時可讓反應闆漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA闆應放在濕盒内，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui後将ELISA闆放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度，特别是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育，反應闆均不宜疊放
，以保證各闆的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應，操作時的室溫應嚴格限制在規定的範圍内，标準室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時，ELISA闆隻要平置於操作台上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。爲保證這一點，一個人操作時，一次不宜多於兩塊闆同時測定。
洗滌
洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟，但卻也決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離遊離的和結合的酶标記物的目的。通過洗滌以清除殘留在闆孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附於固相載體的幹擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的幹擾物質洗滌下來。可以說在ELISA操作中，洗滌是zui主要的關鍵技術，應引起操作者的高度重視，操作者應嚴格按要求洗滌，不得馬虎。洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外，手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種，過程如下：
（1）浸泡式 a.吸幹或甩幹孔内反應液；b.用洗滌液過洗一遍（将洗滌液注滿闆孔後，即甩去）；c.浸泡，即将洗滌液注滿闆孔，放置1-2分鍾，間歇搖動，浸泡時間不可随意縮短；d.吸幹孔内液體。吸幹應*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體後在清潔毛巾或吸水紙上拍幹；e.重複操作c和d，洗滌3-4次（或按說明規定）。在間接法中如本底較高，可增加洗滌次數或延長浸泡時間。微量滴定闆多採用浸泡式洗滌法。洗滌液多爲含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團，也含親水基團，其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合，從而削弱蛋白質與固相載體的結合，並借助於親水基團和水分子的結合作用，使蛋白質回複到水溶液狀态，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%-0.2%之間，高於0.2%時，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。
（2）流水沖洗式 流水沖洗法zui初用於小珠載體的洗滌，洗滌液僅爲蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗，持續沖洗2分鍾後，吸幹液體，再用蒸餾水浸泡2分鍾，吸幹即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖洗式則好比淋浴，其洗滌效果更爲*，且也簡便、快速。已有實驗表明，流水沖洗式同樣也适用於微量滴定闆的洗滌。洗滌時設法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊闆孔表面，洗滌效果更佳。
注：本産品僅供科研使用，不提供臨床，瞭解詳情請：，